用于BOD測試的稀釋水的制備水必須具有良好的質量，以免干擾測試。許多法規要求在5天的測試期間內稀釋水空白的溶解氧（DO）消耗不超過0.2 mg / L。各種因素可能會導致毛坯故障，但眾所周知，水質是造成此類故障的主要因素。

水中的各種污染物可能會對BOD產生影響：

• 有機物
  生化需氧量是微生物在有機物氧化中使用的氧氣量的量度。如果稀釋水中存在有機物，則可能會增加其需氧量。 
   
• 氯或其他消毒劑
  氯通常存在于自來水中，以控制微生物污染。由于氯會干擾BOD測試中使用的微生物，因此應將其從用于稀釋和空白的水中除去。其他常用的自來水消毒劑（氯胺等）也是如此。 
   
• 重金屬（銅，汞，鎘…）
  水必須不含對微生物有毒的重金屬。像消毒劑一樣，任何可能抑制微生物生長的化合物都會對BOD測試產生有害影響。
   
• 細菌
  雖然細菌是BOD測試的必要組成部分，但zui好將其在溶解水中的含量降至zui低，因為它們在儲存過程中可能釋放出有機物。
  
  蒸餾水可用于制備稀釋水。但是，氯可能會與水一起蒸餾并干擾BOD測試。這種水將需要額外的硫代硫酸鈉處理。有時建議從堿性高錳酸鹽中蒸餾，但是該純化步驟也很麻煩。用離子交換樹脂純化的去離子水可能包含有機物和微生物，從而導致BOD空白失效。因此，不建議此測試。
  
  通過反滲透，離子交換，活性炭和紫外線光氧化等多種技術凈化的水有機物含量極低，并且不含對細菌有毒的無機物質。zui適合制備BOD稀釋水。